角膜环钻致角膜损伤兔模型一、服务信息1、动物模型名称:角膜环钻致角膜损伤兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:6、实验动物环境:SPF级二、服务项目服务编号服务内容服务周期价钱DH2021角膜环钻致角膜损伤兔模型5周询价1、实验方法:角膜环钻致兔角膜机械性损伤。耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射速眠新Ⅱ进行兔麻醉。环钻前先用2%硼酸溶液冲洗双眼,再滴**2滴消毒,以保持结膜清洁。开睑,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已灭菌的6mm角膜环钻分别在兔眼角膜上作环切,并滴入2滴氯霉素眼**润洗,用显微眼镊、角膜上皮铲和精细眼剪小心去掉角膜损伤区域上皮,术毕,滴氯霉素眼**2滴。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。三、交付标准:1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。四、服务项目说明:1、如有特殊要求,请另询价。2、双方签订合同后,收取70%首付后启动实验。大脑中动脉(MCA)为临床上发生脑缺血损伤常见的部位之一。北京裸鼠动物模型手术
所用仪器为bio-rad的化学发光凝胶成像系统。结果见图1中c和d,可以看出,通过免疫印迹(westernblot)的方法证明了gm20541蛋白在小鼠脑、肝脏、视网膜、心脏、肾脏以及脾中均有表达。实施例2本实施例以小鼠为目标动物,对本发明提供的视网膜色素变性疾病模型的构建方法进行说明,gm20541基因敲除的路线如图2所示,具体操作如下:基因敲除小鼠获取步骤:1将与小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有报告基因gfp的表达框、有neo抗性基因的表达框、两端有同向排列loxp位点的第3外显子和3’端臂克隆到bac载体(图2)以用于替换欲敲除的gm20541基因第3个外显子;2利用dna同源重组技术将gm20541基因中的第3个外显子替换,得到gm20541基因条件性敲除的小鼠胚胎干细胞;3利用步骤2得到的胚胎干细胞制备得到含gm20541基因敲除细胞的嵌合体小鼠(图2);4将步骤3得到的嵌合体小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中筛选出gm20541基因敲除的杂合子小鼠(图2)。鉴定:实施例2中长距离pcr鉴定阳性子一代鼠的实验结果,扩增5’端长臂使用引物对gm5’lrf和sa3’r,扩增产物为。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。结果见图3中a。湖南高脂高糖动物模型实验小鼠胆管结扎诱导炎症性肝损伤和肝纤维化模型的建立。
实施例7在实施例6的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统,所述动物行为学远程观察单元18包括coms高清图像采集系统、数字视频传输系统、频硬件解压卡、视频显示系统。本实施例的工作原理:系统内配置coms高清图像采集系统(支持icp/ip网络通讯协议)、数字视频传输系统、频硬件解压卡(usb或pci接口用户自选)、视频显示系统(用户自备),保障了实验过程中实时监控与实验结束后操作过程的溯源。例如,在饲养仓2上方装高精密摄像头,搭载手机app,可360°监控动物的行为,并能实时录像,图像采集等,通过监控录像来实现动物学行为观察。以上所述为本实用新型的较佳实施例而已,并不用以限制本实用新型,凡在本实用新型的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本实用新型的保护范围之内。
本发明实施例提供了由上述的方法所得到的视网膜色素变性疾病模型在视网膜色素变性性疾病研究中的应用。进一步地,在本发明的一些实施方案中,所述研究是以非疾病的为目的。通过本发明的构建方法得到的动物模型其具有典型视网膜色素变性性疾病特征,其具有非常广阔的应用前景,例如将其用于研究视网膜色素变性性疾病的发病过程、发病机制,为深入了解研究视网膜色素变性性疾病提供基础。又或者将其用于筛选用于预防或视网膜色素变性性疾病药物、用于评价药物的疗效或预后等。第三方面,本发明实施例提供了由上述的方法所得到的视网膜色素变性疾病模型在筛选用于预防或视网膜色素变性性疾病药物中的应用。在本发明方面提供了构建方法的基础上,本领域技术人员容易想到将由该方法得到的视网膜色素变性疾病模型用于筛选预防或视网膜色素变性性疾病药物或其他类似领域,这也是属于本发明的保护范围。进一步地,在本发明的一些实施方案中,所述应用包括:向所述视网膜色素变性疾病模型施用候选药物,如果所述视网膜色素变性疾病模型在施用所述候选药物前后发生如下变化中的至少一种,则指示所述候选药物可以作为预防或视网膜色素变性性疾病的药物:(1)施用所述候选药物后。用血管内线栓阻断法制备大鼠 MCAO模型。已被脑血管病研究者接受和采用。
小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴,引起轻微的血管扩张;用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀,快速截断小鼠尾尖1-2毫米。如果需要多次采,之后每次需截除2-3毫米;从尾部像尾尖方向按摩,增加血流;用采集血液;结束后,按压伤口或使用止血剂来止血;每次量大约可达。小鼠眼球取血单手保定好小鼠;必要时剪掉小鼠胡须,防止污染血液;轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;用弯头镊夹取眼球并快速在摘取;同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠;大鼠眼眶取血先将小鼠进行麻醉,大鼠翻正反射消失时不在继续麻醉;抗凝处理过的玻璃毛细采样管,掰成2-3厘米长度;右手食指和拇指轻按眼眶两侧皮肤,使眼球突出,毛细管从内侧的眼球与眼睑的缝隙处进入,轻轻旋转毛细管,稍微深入眼球后上方,血液流速快的时候4-5滴即可,温柔的将毛细管取出;用棉签按压大鼠眼眶止血,每次可取血50-100微升,将血液放入冰盒中保存。小鼠心脏取血先将小鼠麻醉,稍靠右侧平躺在手术板上固定;左侧第三四根肋骨间触摸心脏,跳动明显,慢慢进针;针有回血停止进针,开始取血;一次可以300到500微升,小鼠存活,放到加热垫上待小鼠苏醒后放入笼中。恶性黑色素瘤是起源于神经嵴的黑色素细胞恶性。湖北豚鼠动物模型实验室
小鼠CLP盲肠穿孔致脓毒血症模型。北京裸鼠动物模型手术
视网膜外网层及其他相关细胞层出现相应病理改变。因此,视网膜前体细胞中的gm20541基因被敲除的动物可以作为视网膜色素变性疾病模型,用于视网膜色素变性性疾病研究等领域中,为该疾病的研究例如发病过程、机制以及相关药物的筛选提供一种新的模型。进一步地,在本发明的一些实施方案中,敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外显子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全长序列,也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外显子序列,无论敲除那种类型(部分或全长)的序列,只要是能够在前体细胞中沉默gm20541基因的表达,使动物表现出视网膜色素变性性疾病相应特征即落入本发明的保护范围。进一步地,在本发明的一些实施方案中,所述外显子序列选自第1外显子、第2外显子、第3外显子中的任意一个或多个外显子序列。在本发明公开的内容基础上,即在本发明揭示了gm20541基因与视网膜色素变性疾病的相关关系的前提下,本领域技术人员容易想到敲除gm20541基因的任意一个或多个外显子序列,以使gm20541基因的功能受损,进而得到类似的视网膜色素变性疾病模型,此类方法,也是属于本发明的保护范围。进一步地,在本发明的一些实施方案中。北京裸鼠动物模型手术